در عمل باکتریهایی که دارای خواص یکسانی باشند بندرت یافت می‌شوند، حتی باکتریهایی که از یک سلول منشا می‌گیرند ممکن است از نظر یک یا چند صفت با یکدیگر متفاوت باشند. این تفاوتها نتیجه تغییراتی است که به علت جهش ژنی یا موتاسیون در سلولهای باکتریایی پدید می‌آید. این باکتریهای تغییر یافته ، موتانت Mutant نامیده می‌شوند که از نظر بعضی از خواص نظیر ساختمان آنتی ‌ژن ، حساسیت در مقابل آنتی بیوتیکها و ... با سایر باکتریهای مشابه اختلاف دارند.

سهولت تغییرپذیری در باکتریها مربوط به سرعت تقسیم آنهاست. زمان تقسیم یا مدت زمانی که برای تولید یک سلول جدید در باکتریها لازم است، حدود 2 دقیقه و در مورد انسان 20 سال است. مثلا یک سلول باکتری در مدت 18 ساعت 54 نسل بوجود می‌آورد. درحالیکه برای ایجاد همین تعداد نسل انسان بیش از 1000 سال زمان لازم است. پس جهش ژنی در باکتریها نسبت به موجودات عالی خیلی سریع و قابل ملاحظه است.

فیزیولوژیكی های جنین معمولا 12 ساعت بعد از زایمان بایستی خارج شوند و باقیماندن غشا های آلانتوكوریون در داخل رحم در زمان بیشتر دلیل بر حالت پاتولوژیكی می باشد و این باقیماندن جفت ممكن است 4 تا 8 روز و حتی بیشتر ادامه پیدا كند كه در این صورت آثار گندیدگی و تغییرات عفونت در آن پدید می آید بنابراین در صورتیكه بعد از حداكثر 2 روز جفت خارج نگردید بایستی عملیات درمانی را در مورد خارج كردن جفت انجام دهیم تا منجر به عفونت رحمی و ضایعات بعدی نشود .

ادامه مطلب

مقدمه:

مهمترين هدف از نگهداري وپرورش گاو ماده ، توليد شير سالم وگوساله سالم است . در آمد حاصل از فروش شير توليدي ، هزينه هاي نگهداري وتغذيه گاو را تامين مي كند وآنچه كه بهره وسود اقتصادي دامدار به حساب مي آيد ،گوساله هايي است كه متولد مي شوند . به وي‍‍‍‍ژه اگر گوساله متولد شده ماده باشد ،براي داندار صرفه بيشتري دارد . زيرا آن گوساله مدتي بعد به ماده گاوي تبديل ميشود وبراي دامدار سود آور خواهد بود .

ادامه مطلب

تصاویری از یک عمل سزارین گاو

تزریق ماده بی حسی

104450477

برش ناحیه شکمی

216635695

خارج کردن یکی از پاهای گوساله

846033995

301290850

و ادامه این عمل جراحی دشوار

684188760

799248110

دامپزشک در هنگام بخیه زدن رحم گاو

347507673

پایان این عمل جراحی

76670028

کاکادوها:

بطور کلی در کتاب های تخصصی عقیده بر ان است که کاکادوها استعداد مثلا انواع

امازون یا کاسکو را در حرف زدن ندارند.کاکادوی چشم برهنه بایستی بالاترین استعداد

را در یادگیری کلمات در خانواده خود دارا باشد.برخی از انواع کاکادو جیغ های بلندی

کشیده و قادر به تقلید هر نوع صدایی بوده و سوت زدن می اموزد.

لوری ها:

در پاسیو تماس زیادی با نگهدارنده خود داشته باشند به او خو گرفته و حرف زدن نیز

خواهند اموخت.برخی از لوریها به ندرت استعداد حرف زدن دارند.صدای طبیعی انها

را سوت ممتد تشکیل میدهد.

مرغ عشق ها:

برخی از انواع ان قادرند که کلمات محدودی را تلفظ نمایند ولی این به منزله ان نیست

که انها استعداد حرف زدن را کاملا دارا میباشند.

طوطی بزرگ اسکندر(در ایران به شاه طوطی معروف است):

طوطیان اصیل از استعدادخوبی برای حرف زدن برخوردارند.چنین برمی اید که نرها در این

زمینه از ماده ها با استعداد ترند.صدای طبیعی انان نیز مطبوع است.

طوطی کوچک اسکندر(ملنگو):

این طوطی توانایی یادگیری کلمات را دارد

طوطیان جدایی ناپذیر:

انها از استعداد ضعیفی برای حرف زدن برخوردار بوده و یا اصولا توانایی انرا ندارند.اما

صدای طبیعی انها مطبوع است.

طوطی امازون:

درباره استعداد یادگیری کلمات از جانب امازونها عقاید متفاوتی وجود دارد.برخی مثالها

گویای انند که امازونها نیز شبیه طوطیهای خاکستری(کاسکو ها) قادر به یادگیری کلمات

بوده و از کلمات اموخته شده در جای خود و به گونه ای منطقی استفاده می نمایند.

جیغ های طبیعی امازونها در انواع اهلی زمانی مشاهده میشود که حیوان احساس

کم حوصلگی کند.در حالت ترس نیز صدای مخصوصی در می اورد.

طوطی خاکستری(کاسکو):http://kaftarbazan.blogsky.com/

هیچ یک از انواع طوطیها استعداد انواع خاکستری را در حرف زدن ندارند. تنها امازونها

در این خصیصه با انها رقابت دارند.البته نباید فراموش کرد که استعداد حرف زدن خصیصه

ای کم و بیش فردی است.طوطی خاکستری اهلی هر نوع صدایی نظیر صدای سگ و

صدای پرندگان وحشی و صدای تلفن و صدای دریا و سرفه را قادر به تقلید میباشد.انان

تمامی یک اواز را سوت زده و صدای انسانهای اطراف خود را تقلید نموده و کلماتی را

که اموخته اند بطور منطقی و بسته به موقعیت خاص خود به کار میبرند.در صورتیکه

پرنده به طریق مطلوبی نگهداری شود صدای جیغ بلند طبیعیش را به ندرت خواهید

شنید.در عوض صدای ارامی در اورده و می غرد.

طوطی ارا:رhttp://kaftarbazan.blogsky.com/

اراها خصوصا انواعی که از جوانی در مجاورت انسان بزرگ شده باشند برخی کلمات

را خواهند اموخت. اما تنها قادر به تلفظ بعضی کلمات بوده و نمی توانند جمله ای را

ادا نمایند. صدای طبیعی انها جیغ گوش خراشی است که در جانوران اهلی تنها به

هنگام ترس شنیده میشود.

انتخاب یک سگ بالغ به عنوان حیوان خانگی مثل قمار کردن است، چون ممکن است حیوان کاملاً فرمانبردار باشد و تعالیم مربوطه به زندگی در خانه را به خوبی یاد گرفته یا این که از اطاعت از شما سرباز زند. حیوان ممکن است قبلاً آزاد بوده تا به طور خودسر به هر طرف بدود لذا مهار کردن چنین حیوانی مشکل است. در این موارد ممکن است شما صاحب حیوانی شده باشید که مالک قبلی آن به دلیل ناتوانی در نگهداری آن اقدام به فروش یا واگذاری آن کرده است. لذا شما قبل از خریداری یک سگ بالغ حتماً با صاحب قبلی آن تماس بگیرید و از روحیات سگ سؤالاتی بکنید؛ زیرا ممکن است سگ عادات بدی مانند دویدن دنبال وسایل نقلیه، کشتن مرغ و خروس یا گازگرفتن مردم داشته باشد. لذا باید فکر کنید که آیا قادر به نگهداری چنین حیوانی هستید یا نه؛ زیرا این ترحم به حیوان نیست که مدام از خانه‌ای به خانۀ دیگر جابه‌جا شود. اگر شما سگ سرکش و شروری دارید هرگز آن را به شخصی که به دنبال سگ نگهبان می‌گردد ندهید و به قولی خود را از دست آن خلاص نکنید زیرا صاحب جدید آن هم مسلماً به دنبال راهی برای خلاص شدن از آن می‌گردد.

ادامه مطلب

B. abortus-specific primer

Forward: GACGAACGGAATTTTTCCAATCCC (Bricker et al., 1994)
Reverse: TGCCGATCACTTAAGGGCCTTCAT (Bricker et al., 1994)
Product
- Size: 498 bp for field strains

B. melitensis-specific primers

Forward: AAATCGCGTCCTTGCTGGTCTGA (Bricker et al., 1994)
Reverse: TGCCGATCACTTAAGGGCCTTCAT (Bricker et al., 1994)
Product
- Size: 731 for all three biovars

B. ovis-specific primers

Forward: CGGGTTCTGGCACCATCGTCG (Bricker et al., 1994)
Reverse: TGCCGATCACTTAAGGGCCTTCAT (Bricker et al., 1994)
Product
- Size: 976 bp

B. suis-specific primers

Forward: GCGCGGTTTTCTGAAGGTTCAGC (Bricker et al., 1994)
Reverse: TGCCGATCACTTAAGGGCCTTCAT (Bricker et al., 1994)
Product
- Size: 285 bp for biovar 1

RB51/2308 primer

Forward: CCCCGGAAGATATGCTTCGATCC (Bricker et al., 1995)
Reverse: TGCCGATCACTTAAGGGCCTTCAT (Bricker et al., 1995)
Product
- Size: 364-bp for strains 2308 and RB51, and 498-bp for other B. abortus

eri primers

Forward: GCGCCGCGAAGAACTTATCAA (Bricker et al., 1995)
Reverse: CGCCATGTTAGCGGCGGTGA (Bricker et al., 1995)
Product
- Size: 178bp eri

Cat. no. G25	EMB Agar, Levine, 15x100mm Plate, 18ml	10 plates/bag
Cat. no. P09	EMB Agar, Levine, 15x60mm Contact Plate, 15ml	10 plates/bag
Cat. no. J22	Blood / EMB Agar, Levine, 15x100mm Biplate, 10ml/10ml	10 plates/bag
Cat. no. J52	CNA / EMB Agar, Levine, 15x100mm Biplate, 10ml/10ml	10 plates/bag
Cat. no. J58	MacConkey Agar / EMB Agar, Levine, 15x100mm Biplate, 10ml/10ml	10 plates/bag
Cat. no. J88	Rose Agar / EMB Agar, Levine, 15x100mm Biplate, 10ml/10ml	10 plates/bag

INTENDED USE

Hardy Diagnostics EMB Agar, Levine is recommended for use as a selective and differential medium for the isolation of gram-negative bacilli (including coliform organisms and enteric pathogens).

SUMMARY

Eosin Methylene Blue (EMB) Agar was originally developed by Holt-Harris and Teague. Eosin dye was employed to inhibit the growth of gram-positive bacteria. Methylene blue was added as an indicator. Lactose and sucrose served as the nutrients. The production of acid, upon lactose- or sucrose-fermentation, resulted in the two dyes interacting to produce brown to blue-black colonies. This formulation gives sharp and distinct differentiation between colonies of lactose and non-lactose-fermenting organisms. However, it does not discriminate between which carbohydrate (lactose or sucrose) is being fermented. Yersinia enterocolitica, which ferments sucrose but not lactose, will produce the same blue-black colony as lactose-fermenters.^(1-6)

Levine modified the formula by omitting sucrose and doubling the level of lactose. The resultant medium gives excellent differentiation of Escherichia coli from Enterobacter aerogenes. This formulation, by eliminating sucrose, provides reactions that are more in parallel with MacConkey Agar.

EMB Agar, Levine has become the predominant enteric plating medium that utilizes dyes as selective agents. The American Public Health Association recommends its use in the microbiological examination of potable water, waste water, dairy products and foods.^(8,9)The USP recommends its use in the performance of Microbial Limit Tests.⁽⁹⁾

FORMULA

Ingredients per liter of deionized water:*

Pancreatic Digest of Gelatin	10.0gm
Lactose	10.0gm
Dipotassium Phosphate	2.0gm
Eosin Y	0.4gm
Methylene Blue	65.0mg
Agar	15.0gm

Final pH 7.1 +/- 0.2 at 25 degrees C.

* Adjusted and/or supplemented as required to meet performance criteria.

STORAGE AND SHELF LIFE

Storage: Upon receipt store at 2-8 degrees C. away from direct light. Media should not be used if there are any signs of deterioration (shrinking, cracking, or discoloration), contamination, or if the expiration date has passed. Product is light and temperature sensitive; protect from light, excessive heat, moisture, and freezing.

The expiration date applies to the product in its intact packaging when stored as directed.

This product has the following shelf life from the date of manufacture:

90 Days:	G25	EMB Agar, Levine
	P09	EMB Agar, Levine
	J22	Blood / EMB Agar, Levine
	J52	CNA / EMB Agar, Levine
	J58	MacConkey Agar / EMB Agar, Levine
	J88	Rose Agar / EMB Agar, Levine

Refer to the keyword "Storage", in the Hardy Diagnostics software program HUGO™, for more information on storing culture media.

PRECAUTIONS

This product is for in vitro diagnostic use only and is to be used only by adequately trained and qualified laboratory personnel. Observe approved biohazard precautions and aseptic techniques. All laboratory specimens should be considered infectious and handled according to "standard precautions". The "Guideline for Isolation Precautions" is available from the Centers of Disease Control and Prevention at www.cdc.gov/ncidod/dhqp/gl_isolation.html.

For additional information regarding specific precautions for the prevention of the transmission of all infectious agents from laboratory instruments and materials, and for recommendations for the management of exposure to infectious disease, refer to CLSI document M29.

Sterilize all biohazard waste before disposal.

Refer to the keyword "Precautions", in the Hardy Diagnostics software program HUGO™, for more information regarding general precautions when using culture media.

Refer to the keyword "MSDS", in the Hardy Diagnostics software program HUGO™, for more information on handling potentially hazardous material.

For Item P09

This product is for laboratory use only and is to be used only by adequately trained and qualified laboratory personnel. Observe approved biohazard precautions and aseptic techniques. All laboratory specimens should be considered infectious and handled according to "standard precautions". The "Guideline for Isolation Precautions" is available from the Centers of Disease Control and Prevention at www.cdc.gov/ncidod/dhqp/gl_isolation.html.

For additional information regarding specific precautions for the prevention of the transmission of all infectious agents from laboratory instruments and materials, and for recommendations for the management of exposure to infectious disease, refer to CLSI document M29.

Sterilize all biohazard waste before disposal.

Refer to the keyword "Precautions", in the Hardy Diagnostics software program HUGO™, for more information regarding general precautions when using culture media.

Refer to the keyword "MSDS", in the Hardy Diagnostics software program HUGO™, for more information on handling potentially hazardous material.

PROCEDURE

Specimen Collection: Consult listed references for information on specimen collection.^(1-4) Infectious material should be submitted directly to the laboratory without delay and protected from excessive heat and cold. If there is to be a delay in processing, the specimen should be inoculated onto an appropriate transport media and refrigerated until inoculation.

Method of Use: Allow plates to warm to room temperature. The agar surface should be dry before inoculating. Inoculate and streak the specimen as soon as possible after collection. If the specimen to be cultured is on a swab, roll the swab over a small area of the agar surface. Streak for isolation with a sterile loop. Incubate plates aerobically at 35-37 degrees C. for 18-24 hours and protect from light. Examine plates for colonial morphology. If negative after 24 hours, reincubate an additional 24 hours.

INTERPRETATION OF RESULTS

Following incubation, the EMB Agar, Levine is examined for typical colonial morphology. Well isolated colonies of lactose-fermenting bacteria appear brown to blue-black in color. Escherichia coli appears as large, blue-black colonies, often with a green metallic sheen.

Enterobacter presents as brown, mucoid colonies with no sheen. Non-lactose-fermenting colonies, such as Shigella spp. and Salmonella spp., appear transparent and colorless. Consult the listed references for further procedures for identification of isolates.^(1-4)

LIMITATIONS

It is recommended that biochemical and/or serological tests be performed on colonies from pure culture for complete identification.

Some gram-positive bacteria, such as enterococci, staphylococci and yeasts will grow on this medium and usually form pinpoint colonies.

Non-pathogenic, non-lactose-fermenting organisms will also grow on this medium.

Additional biochemical tests must be performed in order to distinguish these organisms from the pathogenic bacterial strains.

Serial inoculation may be required to assure adequate isolation of mixed flora samples.

Refer to the keyword "Limitations", in the Hardy Diagnostics software program HUGO™, for more information regarding general limitations on culture media.

MATERIALS REQUIRED BUT NOT PROVIDED

Standard microbiological supplies and equipment such as loops, other culture media, swabs, applicator sticks, incinerators, and incubators, etc., as well as serological and biochemical reagents, are not provided.

QUALITY CONTROL

The following organisms are routinely used for testing at Hardy Diagnostics:

Test Organisms	Inoculation Method*	Incubation			Results
Test Organisms	Inoculation Method*	Time	Temperature	Atmosphere	Results
Escherichia coli ATCC^® 25922	A	24hr	35°C	Aerobic	Growth; blue-black centered colonies with green metallic sheen
Salmonella typhimurium ATCC^® 14028	A	24hr	35°C	Aerobic	Growth; colorless to amber colonies
Enterococcus faecalis ATCC^® 29212	B	24hr	35°C	Aerobic	Partial to complete inhibition; pinpoint colonies at 24 hours

User Quality Control

Check for signs of contamination and deterioration. Users of commercially prepared media may be required to perform quality control testing with at least one known organism to demonstrate growth or a positive reaction; and at least one organism to demonstrate inhibition or a negative reaction (where applicable). Refer to the following keywords, in the Hardy Diagnostics software program HUGO™, for more information on QC: "Introduction to QC", "QC of Finished Product", and "The CLSI (NCCLS) Standard and Recommendations for User QC of Media". Also see listed references for more information.^(1-5)

* Refer to the keyword "Inoculation Procedures", in the Hardy Diagnostics software program HUGO™, for a description of inoculation procedures.

PHYSICAL APPEARANCE

EMB Agar, Levine should appear clear, and purple with green-orange tinge in color. A fine precipitate is also apparent.

Escherichia coli (ATCC^® 25922) colonies growing on EMB Agar, Levine (Cat. no. G25). Incubated aerobically for 24 hours at 35 deg. C. Shot at an angle to show green sheen.

Escherichia coli (ATCC^® 25922) colonies growing on EMB Agar, Levine (Cat. no. G25). Incubated aerobically for 24 hours at 35 deg. C.

S. typhimurium growing on EMB Agar, Levine

Salmonella typhimurium (ATCC^® 14028) colonies growing on EMB Agar, Levine (Cat. no. G25). Incubated aerobically for 24 hours at 35 deg. C.

Enterococcus faecalis (ATCC^® 29212) colonies growing on EMB Agar, Levine (Cat. no. G25). Incubated aerobically for 24 hours at 35 deg. C.

Uninoculated plate of EMB Agar, Levine (Cat. no. G25).

REFERENCES

1. August, M.J., et al. 1990. Cumitech 3A; Quality Control and Quality Assurance Practices in Clinical Microbiology, Coordinating ed., A.S. Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

2. Murray, P.R., et al. 1995. Manual of Clinical Microbiology, 6th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

3. Forbes, B.A., et al. 1998. Bailey and Scott's Diagnostic Microbiology, 10th ed. C.V. Mosby Company, St. Louis, MO.

4. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol. I & II. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

5. MacConkey, A.T. 1905. Lactose-fermenting bacteria in feces. J. Hyg.; 5:333-379.

6. MacFaddin, J.F. 1985. Media for Isolation, Cultivation, Identification, Maintenance of Bacteria, Vol. I. Williams & Wilkins, Baltimore, MD.

7. Quality Assurance for Commercially Prepared Microbiological Culture Media, M22-A2, Vol. 16, No. 16. 1996. Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI - formerly NCCLS), Villanova, PA.

8. Greenberg, A.E., et al. (ed.). 1992. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 18th ed. APHA, Washington, D.C.

9. The United States Pharmacopeia. 1990. 22nd rev. United States Pharmacopeial Convention, Rockville, MD.

مقدمه:
در ابتداي بنيانگذاري صنعت پرورش مرغ گوشتي وجود يك گله پرورشي با ظرفيت چند صد قطعه همواره علاوه بر نگرانيهاي خاص خود، بسياري از محدوديتها را نيز بدنبال خود داشت. امروزه با بهبود استراتژيهاي مديريتي وجود تجهيزات پيشرفته، ‌انجام برنامه واكسيناسيون و تجويز داروهاي مناسب امكان نگهداري و پرورش تعداد زيادي از جوجه هاي گوشتي را در يك فضاي محدود امكان پذير شده است و اخيراً‌ نيز بخاطر پاره اي از مسائل اقتصادي پرورش طيور صنعتي فارمها نگهداري در ظرفيت هايي بزرگتر با ميانگين تقريبي 300000 - 150000 قطعه پيش مي رود. از مزاياي احداث سالنهاي پرورشي با ظرفيت بالا مي توان به كاهش هزينه هاي ثابت و سر شكن شدن هزينه هاي كارگري و استفاده بهينه از نيروي انساني اشاره نمود. از سوي ديگر ميزان سود حاصله از اين سالنها قطعاً‌ بيشتر خواهد بود. ولي با اين وجود اگر چه احداث سالنهاي با ظرفيت بالا داراي مزاياي اقتصادي انكار ناپذيري است ولي مسائل موجود در روي ديگر سكه نبايد ناديده گرفته شود چرا كه اين سالنها نيز مسائلي از قبيل مشكلات مرتبط به هزينه هاي كارگري، احتمال ابتلا به بيماريهاي شايع در مرغداريها، افزايش هزينه در نتيجه استفاده از تجهيزات و نياز زياد به سرمايه اوليه از جمله مشكلات اين نوع سالنهاي پرورشي مي باشند.

ادامه مطلب

مدیریت جوجه های گوشتی در هفته اول پرورش

گروه علمي و پژوهشي شرکت تلاونگ

پیشرفتهای ژنتیکی برای صفاتی چون رشد و ضریب تبدیل غذایی درجوجه های گوشتی این امکان را فراهم آورده تا پرنده ها در دوره پرورشی کوتاهتر با وزن بیشتر به کشتارگاه فرستاده شوند وبه این ترتیب مدت دوره پرورش که در آن پرنده ها 2کیلوگرم وزن می گیرند از60 روز به 40 روز کاهش پیدا کرده است.

ادامه مطلب

	سالمونلوز به بیماری ناشی از باکتریهای جنس سالمونلا اطلاق می شود . سالمونلاها باکتریهای گرم منفی ، غیرهاگزا و اغلب تاژکدار می باشند که بر اساس تاژکدار بودن یا نبودن به دو گروه عمده تقسیم می شوند.

ادامه مطلب

مقدمه
عفونت هاي سالمونلايي درتمامي نقاط دنيا در ميزبانهاي بسياري همچون حيوانات اهلي ، وحشي و انسان باعث بيماري مي شوند. اطلاعاتي در مورد شيوع سالمونلا در جمعيت دامهاي اهلي ضروري است تا از ارتباط مابين ذخيره سالمونلا با حيوانات و انسان آگاه شويم (6). درانگلستان ،سالمونلا انتريتيديس يكي از مهمترين سروتيپهايي است كه بعد از انجام مراحل پاكسازي و ضد عفوني از سالنهاي پرورش مرغ جدا شده است (9). درحال حاضر درانگلستان افزايش بيماري با ظهور تيپ فاژي 4 باكتري همراه مي باشد(1) . درامريكا فاژ 8 و سويه ديگري غير فاژ 4 بيماريزايي در طيور داشته و سبب مسموميت در انسان نيز مي شود(20) .

ادامه مطلب

در عمل باکتریهایی که دارای خواص یکسانی باشند بندرت یافت می‌شوند، حتی باکتریهایی که از یک سلول منشا می‌گیرند ممکن است از نظر یک یا چند صفت با یکدیگر متفاوت باشند. این تفاوتها نتیجه تغییراتی است که به علت جهش ژنی یا موتاسیون در سلولهای باکتریایی پدید می‌آید. این باکتریهای تغییر یافته ، موتانت Mutant نامیده می‌شوند که از نظر بعضی از خواص نظیر ساختمان آنتی ‌ژن ، حساسیت در مقابل آنتی بیوتیکها و ... با سایر باکتریهای مشابه اختلاف دارند.

سهولت تغییرپذیری در باکتریها مربوط به سرعت تقسیم آنهاست. زمان تقسیم یا مدت زمانی که برای تولید یک سلول جدید در باکتریها لازم است، حدود 2 دقیقه و در مورد انسان 20 سال است. مثلا یک سلول باکتری در مدت 18 ساعت 54 نسل بوجود می‌آورد. درحالیکه برای ایجاد همین تعداد نسل انسان بیش از 1000 سال زمان لازم است. پس جهش ژنی در باکتریها نسبت به موجودات عالی خیلی سریع و قابل ملاحظه است.

ادامه مطلب

· کپسید:پوشش یا غلاف پروتئینی کهژنوم اسید نوکلئیک را در بر می‌گیرد.
· کپسومر (Capsomer):واحدهایمورفولوژی هستند که با استفاده از میکروسکوپ الکترونی در سطح ویروسهای 20 وجهی می‌توان آنها را مشاهده کرد. هر کپسومر متشکلاز مجموعه‌ای از پلی پتدیدمی‌باشد. کپسومرهایی که کاملامشابه یکدیگرند، گاهی از لحاظ شیمیایی با یکدیگر تفاوت دارند.
· ویروس ناقص (Defective Virus):ذره ویروسی را گویند که در بعضی از جنبه‌های همانند سازی از لحاظ عملکردی ناقصاست.
· پوشش Envelope:غشا لیپیدی است کهاطراف برخی از ذرات ویروسی را احاطه می‌کند. این پوشش طی روند کامل شدن ویروس وجوانه زدن از غشا سلولی بدست می‌آید. گلیکوپروتئین‌های رمزگذاری شده توسط ویروس درسطح پوشش قرار می‌گیرند که اصطلاحا آنها را پیلومرمی‌نامند.

· نوکلئوکپسید:مجموعه پروتئین _ اسیدنوکلئیک را گویند که در واقع فرم بسته بندی شده ژنوم ویروس است. این اصطلاح معمولاوقتی بکار می‌رود که نوکلئوکپسید یک جز ساختمانی کوچک از یک ذره ویروسی پیچیده‌ترباشد.
· واحدهای ساختمانی (Structural unit):ساختمان پایه پوسته از جنس پروتئین است و معمولا مجموعه‌ای از چند واحد پروتئینیمتفاوت می‌باشد. واحد ساختمانی غالبا به عنوان پروتومرشناخته می‌شود.
· زیر واحد:یک زنجیره واحد پلی پپتیدیکه به صورت پیچ خورده می‌باشد را زیر واحد گویند.
· ویریون:ذره ویروس کامل است که دربرخی موارد معادل نوکلئوکپسید است، اما در ویریونهای پیچیده شامل مجموعه نوکلئوکپسید و پوشش محیطی آن است. ویریون در انتقال اسید نوکلئیک ویروسی از سلولیبه سلول دیگر نقش دارد.
· دوره تغذیه اکتسابی:زمانی است کهناقل عاری از ویروس از منبع ویروس تغذیه می‌کند.
· پایداری:زمانی است که یک ناقل ، پساز جدا شدن از منبع ویروس ، می‌تواند آلوده باقی بماند.
· ویروسهای نیش زاد:ویروسهایی هستندکه بر روی نیش آرواره‌ای حمل می‌گردند و اکثر یا تمام ویروسهای ناپایا را شاملمی‌شوند.
· ویروسهای گردش کننده:ویروسهاییهستند که از دیواره معده ناقل عبور می‌کنند و واردخونولنف می‌شوند. سپس از طریق غدد بزاقیقطعات دهانی ناقل را آلوده می‌سازند. اینها در ناقل تکثیرنمی‌یابند.
· ویروسهای تکثیر شونده:ویروسهاییهستند که در بدن ناقل خود تکثیر می‌یابند.

بونياويريده تعداد زيادی حداقل 200 ويروس دارای Envelope با زنجير منفی RNA قطعه شده را در بر دارد. اين ويروسها بر اساس خصوصيات ساختمانی و بيوشيميايی به 4 جنس تقسيم شده اند: بونياويروس (Bunyavirus)، فلبوويروس (Phlebovirus)، نايروويروس (Nairovirus) و هنتاويروس (Hantavirus). اکثر بونيا ويروسها آربوويروس هستند يعنی از طريق آرتروپود، بندپايان منتقل می شوند) که به وسيله ی پشها، کنه ها، يآ مگسها انتشار می يابند و در شرايط محيطی اندمی هستند. هنتاويروسها مورد استثنا بوده زيرا به وسيله ی جوندگان حمل می شوند.

ادامه مطلب

مطلب از دانشجو مهتاب معیری:

اين باكتری( Bacillus.anthracis)عامل بيماری سياه زخم هست كه به زبان انگليسي آنتراكس Anthrax و به فرانسوی شاربن مي نامند و نام آنتراكس از كلمه يونانی anthrakis به معنی ذغال گرفته شده كه بدليل زخم سياه رنگی هست كه در اين بيماری بوجود مياد. از بيماريهای مشترك انسان و تعداد زيادی از حيوانات است كه البته در حيوانات شايعتر و در انسان كمتر هست. باكتری ميله ای شكل و غيرمتحرك و دارای كپسول بوده و هوازی-بی هوازی اختیاری است از خصوصيات مهم اين جنس و اين باكتری توليد هاگ يا اسپور Spore است به همین دلیل مقاومت محیطی زیادی دارند و اکثرا در آب هوا و بخصوص خاک حضور دارند.در مورد خصوصيات شكلی و كشت و بیوشیمیایی باكتری بطور مفصل . AX در مورد مقاومت این باکتری باید گفت که فرم رویشی و جوانه زده مقاومتی همانند مقاومت سایر باکتری های بدون هاگ دارد یعنی حساس هست و در گرمای 60 درجه و مواد ضد عفونی کننده عادی بزودی از بین میرود ولی هاگ یا اسپور آن سالها در شرایط عادی باقی می ماند و پس از این مدت اگر در شرایط مناسب قرار گیرد به فرم رویشی تبدیل می شود.گزارش های مختلفی از دوام هاگ این باکتری وجود دارد بطوریکه بقاء آن را در طبیعت تا 60 سال گزارش کرده اند. عواملی که باعث هاگ گذاری تبدیل هاگ به فرم رویشی و تبدیل فرم رویشی به هاگ می شود موجب بقاء باکتری است که در این مورد می توان به زمینهای قلیائی و حاوی آهک و مقداری ازت در اثر نباتات گندیده (که این مناطق به مناطق گرمخانه ای موسوم هستند) و همچنین فصول بارانی و خشکسالی های پی در پی و گرمایی بیش از 15 درجه اشاره کرد که تناوب تبدیل هاگ به رویشی و رویشی به هاگ را تامین می کند (این تبدیلات بطور استثنا در هاگ این باکتری وجود دارد یعنی با مساعد شدن شرایط به فرم رویشی تبدیل میشود و با نامساعد شدن مجددا به شکل هاگ برمیگردد). اسپور باکتری در دمای 120 درجه سانتیگراد در تحت فشار در اتوکلاو به مدت 15 دقیقه از بین میرود. عوامل دیگری که در از بین بردن هاگ این باکتری موثر است: گرمای خشک 140 درجه به مدت بیش از 3 ساعت محلول 10% فرمالین در دمای 40 درجه به مدت 15 دقیقه( اما در دمای کمتر مدت زمان بیشتری مورد نیاز است) محلول 5% سود سوزآور. اما نور آفتاب و گندیدن لاشه بر هاگ باکتری اثر کمی دارد. بیماری سیاه زخم یا شاربن در حیوانات و انسان: در دام ها در شرایط طبیعی تمام علفخواران نسبت به این بیماری حساسیت زیادی دارند.نشخوارکنندگان بویژه گوسفند و گاو و بز بسیار حساس می باشند و در صورت ابتلا بیماری بیشتر به شکل فوق حاد بوده و تلف میشوند.حساسیت دام های تک سمی نیز زیاد است اما از نظر حساسیت بعد از نشخوارکنندگان قرار دارند.گوشتخواران حساسیت کمی دارند و بطور استثناء ممکن است مبتلا شوند.پرندگان به این بیماری مقاومت دارند به استثنای شترمرغ که حساس است. نژاد در حساسیت دامها موثر است بطوریکه گوسفندان آفریقا نسبت به سایر نژادها مقاومت بیشتری به شاربن دارند همچنین حیوانات مسن بذلیل ایمنی اکتسابی و تدریجی بیش از حیوانات جوان مقاومت دارند. انسان به بیماری شاربن حساس بوده و با تماس با حیوانات مبتلا و یا فراورده های آلوده به این بیماری مبتلا میشود. راه انتقال انتشار و ورود بیماری: بیماری شاربن در انسان در نتیجه تماس مستقیم با حیوانات بیمار و یا فراورده های حیوانات مثل پوست مو و پشم ایجاد می شود بنابراین دامپزشکان دامداران میکروب شناسان کشاورزان چوپانان کارگران کشتارگاهها و کارگرانی که در صنایع پوست و پشم کار می کنند بیشتر در معرض ابتلاء به این بیماری هستند.در حیوانات میکروب شاربن بطور مستقیم از حیوان آلوده به حیوان سالم منتقل نمی شود بلکه میکروب در بافتهای حیوانات مبتلا وجود داشته و کمی قبل از مرگ از راه ترشحات مختلف به خارج دفع میشود همچنین اگر لاشه حیوانات تلف شده کالبدگشایی شود و یا در دسترس پرندگان و یا حیوانات شکاری قرار گیرد ممکن است بطور وسیع و خطرناکی میکروب را در خاک پراکنده کند بنابراین انتشار میکروب در یک منطقه ممکن است بوسیله جریا آب حشرات سگها و سایر گوشتخواران پرندگان وحشی و یا مدفوع دامهای مبتلا تامین شود. ورود عفونت به یک منطقه غیرآلوده همواره بوسیله مواد آلوده حیوانی مانند گرد استخوان کود پوست روده پشم و مواد کنسانتره و یا علوفه آلوده صورت میگیرد. میکروب شاربن در انسان و حیوان ممکن است از راه خراش های پوستی یا از راه گوارشی و یا از طریق تنفس ایجاد آلودگی نماید گرچه در بیشتر مواقع طرز ایجاد آلودگی به درستی معلوم نیست اما غالبا تصور می شود که دامها در نتیجه خوردن غذاها و یا آب های آلوده مبتلا میشوند و در انسان میکروب بیشتر از راه خراش های پوستی وارد بدن می شود ولی ندرتا ممکن است از راه مخاط دستگاه تنفس و یا گوارش افراد را مبتلا کند. بنابراین بسته به راه ورود میکروب سه نوع شاربن ایجاد میشود: شاربن پوستی شاربن تنفسی و شاربن گوارشی. بیماری زایی شاربن: باسیلوس آنتراسیس از طریق تولید سم یا زهرابه به میزبان حمله میکند بطور دقیقتر بیماریزایی باسیلوس آنتراسیس به دو عامل مربوط است: کپسول و زهرابه. به این ترتیب که کپسول باکتری را در برابر بیگانه خوارها و فاگوسیت ها و سایر عوامل دفاع غیرآختصاصی بدن محافظت می کند و زهرابه یا توکسین از سه جزء مهم پروتئینی تشکیل شده است. برای مطالعه بیشتر مکانیسم بیماریزایی باکتری Ç?äÌÇ ˜áی˜ ˜äیÏ. AX سیاه زخم پوستی: معمولا در مناطقی از پوست دست و بازو که بیشتر در معرض تماس با آلودگی هستند روی می دهد(پوست صورت و گردن هم با شیوع کمتری گرفتار می شوند). علائم: ضایعه معمولا با ایجاد جوش بی درد در محل ورود میکروب آغاز می شود که به سرعت گسترش می یابد و به قرحه ای که اطراف آن را طاولهای کوچک احاطه کرده اند منجر می شود و به نکروز قرمز تیره و سیاه رنگی تبدیل می شود (در مرکز زخم یک اثر و جای زخم سیاه رنگ بوجود می آید).این ضایعه قطر 1 تا 3 سانتیمتری داشته و به آن پوسچول بدخیم (malignant pustule) می گویند. در اثر زهرابه میکروب خیز و ادم وسیع بزرگ شدن عقده های لنفاوی(لنفادنوپاتی) تب بی حالی و نیز سر درد هم ممکن است دیده شود. بیماری در اکثر موارد خودبخود محدود شده و بهبودی حاصل می شود اما موارد درمان نشده می تواند به باکتریمی (وجود باکتری در خون ) مننژیت و مرگ منجر شود و این تلفات در اینگونه افراد حدود 20% است. این بیماری در مناطق استوایی شایع تر است سیاه زخم تنفسی یا ریوی در انسان که بیماری پشم ریسان هم خوانده می شود در اثر استنشاق اسپور ها ایجاد می گردد که در ابتدا آثاری شبیه به سرماخوردگی دارد ولی بزودی به بیماری شدید ریوی و پنومونی تهدید کننده تبدیل می شود.میزان تلفات در این شکل بیماری حتی افرادیکه تحت درمان دقیق قرار می گیرند زیاد است چون وقتی به بیماری مظنون می شوند که جراحات قابل ترمیم نیست. علائم: تب سرفه خشک احساس ناراحتی در پشت جناغ سینه و نهایتا تنگی نفس حاد تعریق و سیانوز .پرده جنب ریه هم درگیر می شود و پس از آن تجمع مایع خونی در فضای پلور ( فضای بین دو پرده جنب) روی می دهد. بیماری به سرعت پیشرفت می کند و در عرض 24 تا 36 ساعت شوک افت دمای بدن و مرگ رخ می دهد. تشخیص: تهیه گسترش و دیدن باسیل های گرم مثبت و بزرگ که بصورت زنجیره ای قرار گرفته اند. اسپورها معمولا در گستره های بدست آمده از ترشح زخم دیده نمی شود . آزمایشات سرولوژی مفید نیستند. پیشگیری و درمان: سوزاندن یا دفن لاشه های آلوده در گودال های عمیق دارای آهک_ ضدعفونی محصولات حیوانی (بوسیله اتوکلاو)_ استفاده از دستکش و پوشاک محافظت کننده در افرادی که در خطر بالای ابتلاء قرار دارند_ ایمن سازی فعال دام ها به کمک واکسن زنده ضعیف شده (تخفیف حدت یافته) در این مورد واکسنی که وجود دارد حدود 9 ماه به دام ایمنی می دهد_ واکسینه کردن افرادی که در خطر شغلی بالایی هستند. این واکسن بدون سلولی و حاوی آنتی ژن محافظت کننده (PA ) خالص شده می باشد. درمان بوسیله پنی سیلین G انجام می شود که موثرترین درمان است. سویه های مقاوم تاکنون از بیمار جدا نشده است. پیشگیری و درمان: سوزاندن یا دفن لاشه های آلوده در گودال های عمیق دارای آهک_ ضدعفونی محصولات حیوانی (بوسیله اتوکلاو)_ استفاده از دستکش و پوشاک محافظت کننده در افرادی که در خطر بالای ابتلاء قرار دارند_ ایمن سازی فعال دام ها به کمک واکسن زنده ضعیف شده (تخفیف حدت یافته) در این مورد واکسنی که وجود دارد حدود 9 ماه به دام ایمنی می دهد_ واکسینه کردن افرادی که در خطر شغلی بالایی هستند. این واکسن بدون سلولی و حاوی آنتی ژن محافظت کننده (PA ) خالص شده می باشد. درمان بوسیله پنی سیلین G انجام می شود که موثرترین درمان است. سویه های مقاوم تاکنون از بیمار جدا نشده است.

A colony is dried on a slide and treated as follows

Step 1. Staining with crystal violet.

Step 2. Fixation with iodine stabilizes crystal violet staining. All bacteria remain purple or blue.

Step 3. Extraction with alcohol or other solvent. Decolorizes some bacteria (Gram negative) and not others (Gram positive).

Step 4. Counterstaining with safranin. Gram positive bacteria are already stained with crystal violet and remain purple. Gram negative bacteria are stained pink.

Under the microscope, the appearance of bacteria is observed. Questions to be asked include: Are they Gram positive or negative? What is the morphology (rod, coccus, spiral, pleomorphic [variable form] etc)? Do cells occur singly or in chains, pairs etc? How large are the cells? There are other less commonly employed stains available (e.g. for spores and capsules).

Another similar colony from the primary isolation plate is then examined for biochemical properties (e.g. will it ferment a sugar such as lactose). In some instances the bacteria are identified (e.g. by aggregation) with commercially available antibodies recognizing defined surface antigens. Molecular tests are now widely used.

کلستریدیوم و بوتولینوم در غذاهای اسیدی رشد نمی کنند و لذا سمی تولید نمی شود. با این وجود PH پایین هر سم از پیش تهیه شده را, غیر فعال نمی کند.

بوتولیسم استنشاقی به دنبال استنشاق سم (درائروسل) در کارکنان آزمایشگاه رخ داده است. در چنین مواردی علائم عصبی ممکن است همان بوتولیسم غذایی باشد ولی دوره نهفته ممکن است طولانی باشد.

ادامه مطلب

مورفولوژی و سایر مشخصات كلستريديوم‌ها:

1_ ارگانيسم‌هاي مشخص و برجسته: اسپور كلستريديوم‌ها معمولا پهن‌تر از قطر باسيلي است كه در داخل آن شكل گرفته‌اند و در گونه‌هاي مختلف بطور مركزي، نزديك به انتهايي يا انتهايي باكتري قرار گرفته است. بيشتر كلستريديومها متحرك بوده و تاژك دارند. به عنوان مثال در اينجا تصوير اسپور دو گونه‌ از كلستريديوم را مي‌توانيد ببينيد ( به طور كلي دو جنس مهم كه توليد اسپور مي كنند باسيلوس‌ها و كلستريديوم‌ها هستند ).

ادامه مطلب

نویسنده : colony

"کریگ ونتر" پدر اولین نقشه ژنتیکی انسان اعلام کرد که به همراه تیم خود اولین سری از سلولهای مصنوعی با توانایی خودتکثیری را با موفقیت ایجاد کرده است.

کریگ ونتر مختصص ژنتیک که سابقه ای طولانی در تلاش برای ایجاد حیات مصنوعی دارد اعلام کرد: "ما سلولهایی را طراحی، ترکیب و ایجاد کردیم که می توانند خود را تکثیر کنند."پدر اولین نقشه DNA و اولین کروموزم مصنوعی ادامه داد: "فکر می کنیم که این نتایج چه از دیدگاه علمی و چه از نظر فلسفی واقعا مهم باشد و به طور حتم می تواند نگاه ما را به مفهوم حیات تغییر دهد."ونتر افزود: "سلول مصنوعی یک ابزار واقعا کارآمد برای طراحی تمام آن چیزهایی است که می خواهیم در زیست شناسی آنها را انجام دهیم. ما در ذهن تعداد بیشماری از کاربردهای محتمل را برای این سلول می پرورانیم."اولین سلول مصنوعی تاریخ حیاتاز میان اولین کاربردهای سلول مصنوعی می توان به ایجاد باکتریهای ناجی محیط زیست اشاره کرد که ونتر از سالیان قبل بارها درباره آنها سخن گفته بود. این باکتریهای مصنوعی می توانند به عنوان کارخانه های زنده سازنده سوختهای زیستی و یا برای آزاد کردن آب و زمین از مواد آلاینده مورد استفاده قرار گیرند.همچنین این سلولها می توانند قارچهایی را تولید کنند که همانند اسفنج، دی اکسید کربن را جذب می کنند و یا برای ایجاد باکتریهایی که واکسنها را تولید می کنند به کار روند.اولین سلول مصنوعی که "میکوپلاسم میکوئیدز JCVI-syn1.0" نام دارد در موسسه کریگ ونتر در راکویل توسط گروهی به سرپرستی دانیل گیبسون ساخته شده است.این سلول از نظر ظاهری طبیعی به نظر می رسد اما کاملا توسط DNA مصنوعی کنترل می شود.در سال 2007 این محققان موفق شدند اولین DNA سنتزی را با تکثیر مصنوعی باکتری "میکوپلاسم میوکوئیدز" به دست آورند.
در سال 2009 و در ادامه این مطالعات توانستند با انتقال ژنوم (طبیعی) میکوپلاسم میکوئیدز به باکتری دیگری به نام "میکوپلاسم کاپریکولوک"، اولین پیوند DNA را انجام دهند.یکی از اعضای تیم تحقیقاتی کریگ ونتر مشغول کار بر روی کیت ایجاد کننده سلول مصنوعی استاکنون با استفاده از این دو سابقه تحقیقاتی موفق شدند با پیوند DNA مصنوعی و بارگذاری آن به روی یک سلول باکتری بدون DNA، "اولین سلول مصنوعی تاریخ بشر" را ایجاد کنند.پدر سلول مصنوعی در این خصوص توضیح داد: "ما این سلول را مصنوعی نامیدیم چون از یک کروموزم مصنوعی به دست آمده و با استفاده از اطلاعات پردازش شده در یک رایانه، ترکیبات شیمیایی و یک سنتزکننده DNA ساخته شده است. این ترکیب از حدود یک میلیون حرف DNA تشکیل شده است (تعداد حروف DNA انسان 2/3 میلیارد است). این DNA مصنوعی کاملا شبیه به یک DNA طبیعی است و می تواند در طول فرایند ایجاد، دستخوش جهشهای ژنتیکی شود."الگوی اولین سلول مصنوعی کریگ ونتر که این نتایج مهم را در مجله علمی "ساینس" منتشر کرده است ادامه داد: "این سلولی است که می تواند مفهوم حیات را تغییر دهد. این اولین نوع از موجودات خود تکثیرکننده بر روی سیاره زمین است که پدرشان یک رایانه است."به اعتقاد این دانشمند آمریکایی، این سلول مصنوعی، نمونه آزمایشی آن چیزی است که از آن می توان به عنوان پتانسیل منحصر به فرد علمی یاد کرد.

ايوزين متيلن بلو آكار نوعي محيط كشت افتراقي است كه براي تشخيص و جداسازي باكتري هاي ميله اي روده اي كرم منفي استفاده مي شود. همجنين ايوزين متيلن بلو آكار مانع از رشد باكتري هاي كرم مثبت مي شود. مبناي افتراق در اين محيط بكاركيري دو رنك شاخص يعني ايوزين و متيلن بلو‘است كه متمايزكننده تخميركننده هاي لاكتوز ازاركانيسمهاي فاقد توانايي تخمير لاكتوز مي باشد. در اين محيط باكتري هاي تخمير كننده لاكتوز داراي كلني هايي بامركز تيره هاشيه اي شفاف خواهند بود در حاليكه اركانيسم هايي كه نميتوانند لاكتوز را تخميركنند‘ كلني هاي كاملا بي رنك خواهند داشت.

اين محيط براي شناسايي باكتري هاي ميله اي روده اي كرم منفي بكار مي رود.اين محيط مقياسي است براي تشخيص باكتري هايي كه مي توانند سه قند كلوكز، ساكارز و لاكتوز را مورد استفاده قرار دهند بترتيب غلظت هاي 1/0% ، 1% و 1% . يك شاخص pH در محيط قرار دارد تا توليد اسيد از تخمير كربوهيدراتها تعيين شود.تغيير رنك به زرد شاخص وجود اسيد در محيط است درحاليكه عدم تغيير رنك شاخص قليايي بودن محيط است. تلقيح محيط داراي دو مرحله است: اول، يك لوب از باكتري را روي سطح محيط مي كسترانيم. دوم، يك نيدل از باكتري را به طور عمقي در داخل لوله فرو ميكنيم. تجزيه كربوهيدرات با اناليز كردن مقدار اسيد توليد شده تعيين مي شود.اسيد توليد شده در محدوده ته لوله بدليل تجزيه كلوكز است. كه بدليل غلظت كم كلوكز نسبت به شكر است بنابراين اسيد توليد شده وسعت زيادي نخواهد داشت. اسيد توليد شده در بخش مورب يا عميق نشانكر تخمير ساكارز يا لاكتوز است زيرا غلظت اين ساكارز نسبتا زياد است بنابراين اسيد توليد شده بطور كسترده بخش مي شود. همجنين اين محيد مي تواند احياي سديم سولفات را به هيدروزن سولفيد تعيين كند. هيدروزن سولفيد توليد شده موجب تيره شدن قسمتهايي از محيط خواهد شد. توليد ساير كازها با ترك خوردن آكار و نيز با ايجاد شكاف در ته لوله آزمايش نشان داده مي شود.

يكي از محيط هايي كه براي تمايز استافيلوكوكهاي پاتوژن بكار مي رود مانيتول سالت آگار است. غلظت بالاي نمك در اين محيط مانع از رشد بيشتر ميكروارگانيسمها مي شود.نه تنهااستافيلوكوك هاي پاتوژن مي توانند در اين محيط رشد كنند بلكه آنها در اين محيط اسيد هم توليد ميكنند.اين اسيد توليد شده به عنوان شاخصpH موجب تغيير رنك محيط از قرمز به زرد مي شود . استافيلوكوك هاي غير باتوزن نيز قادر به رشد در اين محيط هستند ولي نميتوانند اسيد توليد كرده رنك آن را تغيير دهند.

محيطهاي كشت را متناسب با نوع آزمايش مي‏توان به دو صورت مايع و جامد تهيه كرد .

1- محيط كشت مايع :

محيطهاي مايع به علت نداشتن آگارد در تركيب خود به صورت جامد در نيامده و متناسب با نوع ميكروارگانيسم و آزمايشهاي مورد نظر مي‏توان آنها را در لوله‏هاي آزمايش ـ ارلن ماير و يا ظروف ديگر مورد استفاده قرار داد .

2- محيط كشت جامد :

محيطهاي جامد به علت دارا بودن آگار در تركيب خود به صورت جامد بوده و متناسب با ميكروارگانيسم ها و آزمايش هاي مورد نظر مي‏توان آنها را در لوله ظروف پتري و يا ظروف ديگر مورد استفاده قرار داد .

2-1- كشتهاي جامد در لوله را مي‏توان به صورتهاي زير تهيه كرد .

2-1-1- كشتهاي عمقي ( عمودي ) (Stab Cultures) :

حدود 5 الي 10 ميلي ليتر از محيط كشت را در لوله آزمايش ريخته و به طور عمودي مي‏گذارند تا محيط بسته شود.

سپس ميكروارگانيسمها را توسط سوزن كشت به طور عمقي در مركزاين محيط كشت مي‏دهند .

2-1-2- كشت در داخل محيط جامد(Shake Cultures):

به لوله‏هاي آزمايش محتوي محيط كشت جامد پس از ذوب شدن كه تا 45 درجه سلسيوس سرد شده است. باكتري مورد نظر را افزوده و لوله را بين دستها تكان مي‏دهندتا باكتريها كاملا با محيط كشت مخلوط شوند , سپس لوله آزمايش را به طور عمودي قرار مي‏دهند تا محيط بسته شود .

2-1-3- كشت شيب دار(Slant (slope) Cultures ) :

حدود 5 ميلي ليتر از محيط كشت جامد (ذوب شده) در لوله آزمايش و يا لوله‏هاي كوچك ديگر ريخته مي‏شود و پس از سترون كردن آنها را به صورت كج به گونه‏اي مي‏خوابانند كه سطح محيط كشت شيب دار باشد .

ميكروارگانيسمها را با سوزن كشت در عمق و سطح و يا به وسيله سوزن كشت با نوك حلقه‏اي ( لوپ ) در سطح شيب دار كشت مي‏دهند .

2-2- كشت جامد در ظرف پتري ـ كه به سه صورت انجام مي‏گيرد :

2-2-1- كشت خطي در سطح محيطهاي جامد در ظرف پتري:

با اين روش مي‏توان ميكروارگانيسم را بطور خطي توسط سوزن كشت نوك حلقه‏اي ( لوپ ) در سطح محيط جامد كشت داد .

۲-2-2- كشت در سطح محيط :

در اين روش توسط پي پت مقدار مشخص از رفت معيني از ميكروارگانيسم را در سطح محيط جامد ريخته و با ميله پخش كننده , كاملا در سطح محيط مي‏گسترانند .

2-2-3- كشتهاي دو لايه :

در اين روش كشت مايع باكتري ( سوسپانسيون باكتري ) به محيط كشت ذوب شده (حرارت 45 درجه سلسيوس ) افزوده مي‏شود. در صورت لزوم باكتري را با لايه نازكي از همان محيط كشت مي‏پوشانند و پس از بسته شدن محيط ظرفهاي پتري را به طور واژگون در گرمخانه قرار مي‏دهند تا از ريختن قطرات آب درسطح محيط جلوگيري گردد .

2-3- انواع محيطهاي كشت ـ محيطهاي كشت را از نظر تركيب شيميايي و دارا بودن مواد غذائي يا مواد باز دارنده مي‏توان به چند دسته تقسيم كرد .

2-3-1- محيط كشت انتخابي (Selective) :

اين محيطها براي جدا كردن يك يا دسته‏اي از ميكروارگانيسم‏ها بكار مي‏روند و به علت دارا بودن مواد بازدارنده، از رشد ميكروارگانيسم‏هاي ناخواسته جلوگيري مي‏كنند مانند محيط برد باركر جهت جدا كردن استافيلوكوكوس اورئوس و يا محيط S.S براي سالمونلا و شيگلاو يا محيط داراي نمكهاي صفراوي براي جدا كردن كلي فرمها .

Bile Esculin

2-3-2- محيطهاي كشت غني كننده (Enrichment) :

اين محيطها معمولا در مواردي به كار مي‏روند كه تعداد ميكروارگانيسم مورد جستجو در نمونه غذائي كم بوده و يا به علت وجود زياد ميكروارگانيسم‏هاي ديگر جدا كردن آن با اشكال مواجه است.اين محيطها با تركيب خاص خود از نظر pH و مواد غذائي امكان رشد براي ميكروارگانيسم مورد نظر را فراهم مي‏كند،مانند محيط گوشت پخته براي جدا كردن استافيلوكوكوس اورئوس .

2-3-3- محيطهاي كشت افتراتي ( جدا كننده ) (Differential) :

محيطهايي هستند كه ميكروارگانيسم‏هاي مختلف در آن ويژگيهاي خاص خود را نشان مي‏دهند , مانند محيط هاي خون دار كه در آن نمونه‏هاي هموليتيك و غير هموليتيك از هم جدا مي‏شوند . و محيط مك كانكي آگار كه در آن كلي فرمهاي تخمير كننده لاكتوز پرگنه‏هاي قرمز مي‏دهند . در حالي كه باكتريهاي روده‏اي كه قادر به تخمير لاكتوز نيستند مانند سالمونلا پرگنه‏هاي بي رنگ به وجود مي‏آورند .

هكتون انتريك آگار محيطي انتخابي براي جداسازي و ترميم نمونه هاي مدفوعي متعلق به باكتري هاي روده اي به ويزه سالمونلا و شيگلا است. اين محيط باكتري هاي تخميركننده لاكتوز را از آنهايي كه نميتوانند از تخمير لاكتوز ، اسيد توليد كنند با ايجاد رنگ زرد - نارنجي روي محيط مناسب در حضور شاخص pH متمايز مي كند . باكتري هايي كه لاكتوز راتخمير نمي كنند، روي محيط تغيير رنگ ایجاد نمي دهند. هكتون انتريك آكار مي تواند توليد گاز هيدروژن سولفيد را با تيره نمودن بخش هايي از محيط نشان دهد.

کاربرد:

فنل رد براث بيس به همراه كربوهيدرات ها جهت جداسازي ميكروارگانيسم ها بر مبناي توانايي تخمير كربوهيدراتها بكار مي رود

شرح مختصري از محيط مذكور:

توآنايي تخميري باكتري ها معياري با ارزش براي شناسايي آنهاست. يك محيط پايه براي تعيين واكنش هاي تخميري ميكروارگانيسم ها بايد بتواند رشد ميكروب مورد آزمايش را تامين كند و اجازه تخمير كربوهيدرات ها را به ميكروب بدهد. در حقيقت در محيط كشت مناسب براي تست تخمير ، معرف فنل رد به عنوان شاخص pH بكار برده مي شود که نتايج دقيقي را فراهم مي كند.

فنل رد براث بيس جهت تعيين توانايي تخمير انواع كربوهيدرات ها معرفي مي شود. ممكن است در غلظتهاي مناسب تخمير انواع مواد دراین محیط صورت گيرد.غلظت مناسب براي كربوهيدرات ها براي تست واكنشهاي تخمير باكتريايي معمولا بين 5/0 تا 1% فراهم مي شود. برخي مطالعات اشاره مي كنند كه براي اطمينان بهتر است از 1% استفاده شود تا 5/0% .

اصول و روش ها :

منابع نيتروژن، آمينواسيدها و كربن با گوارش آنزيماتيك كازئين در فنل رد براث بيس تامين مي شود . مقدار سديم - كلريد توسط تعادل اسمزي محيط متعادل مي شود . هنگامي كه از تخمير كربوهيدرات هاي افزوده شده ، اسيد توليد مي شود شاخص فنل رد از قرمز – نارنجي به زرد تغيير رنگ ميابد.

فرمول/ ليتر

آنزيم گوارشي كازئين .............................................10گرم

سديم كلريد .............................................................5گرم

فنل رد .....................................................................018/0گرم

pH نهايي .............................................................. C°25 در 2/0 ± 4/7

كربوهيدرات مورد نظر ........................................... 10- 5 كرم

روش ساخت محيط:

1- 15 كرم بودر محيط را در 1 ليتر آب مقطر حل كنيد.

2- محيط را حرارت داده و به مدت 1 دقيقه بجوشانيد تا كاملا حل شود.

3- 10 تا 5 كرم كربوهيدرات مورد نظر را افزوده بمدت 5 دقيقه در اتوكلاو با دماي C°121 قرار دهيد.

4- بترتيب محلول كربوهيدرات ها را با فيلتر استريل كرده و محيط مايع استريل را خنك كنيد.

مشخصات كنترل كيفي

علايم دهيدراته شدن: بودر بصورت يكدست بوده و برنك قرمز روشن – قهوه اي روشن است.

ظاهر محيط آماده شده : محيط آماده بدون كربوهيدراتها برنك قرمز روشن و شفاف است.

نتايج كشت: باسخ كشت روي محيط فنل رد براث بيس بعد از 48 – 18 ساعت در دماي C°35 انكوباتور مشاهده خواهد شد.

Microorganism Response W/ Dextrose

Acid Gas

Escherichia coli ATCC® 25922 growth + +

Proteus vulgaris ATCC® 13315 growth - -

Salmonella typhimurium ATCC® 14028 growth + +

The organisms listed are the minimum that should be used for quality control testing.

References

1. Isenberg, H. D. (ed.). 1992. Clinical microbiology procedures handbook. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

2. Murray, P. R., E. J. Baron, M. A. Pfaller, F. C. Tenover, and R. H. Yolken (eds.). Manual of clinical microbiology, 6th ed.

American Society for Microbiology, Washington, D.C.

3. Vera, H. D. 1950. Relation of peptones and other culture media ingredients to accuracy of fermentation tests. Am. J. Public Health.

40:1267.

4. Bacteriological Analytical Manual. 1995. 8th ed. AOAC International, Gaithersburg, MD.

5. Vanderzant, C., and D. F. Splittstoesser. 1992. Compendium of methods for the microbiological examination of food. American

Public Health Association, Washington, D.C.

6. Association of Official Analytical Chemists. 1995. Official methods of analysis of AOAC International. AOAC International,

Arlington, VA.

7. MacFaddin, J. F. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of medical bacteria. Williams & Wilkins,

Baltimore, MD.

هودهای ميکروبی و کشت سلول

1- مطئن شويد که محيط هود از کار قبلی تميز شده است. برای اطمينان بيشتر يکبار ديگر به طور کامل داخل هود را با الکل 70 درصد بادستمال بدون کرک پاک کنيد.

ادامه مطلب